本发明属于果蔬采后贮运领域，涉及葡萄贮运技术，尤其是一种适于薄皮葡萄贮运的应激保鲜方法与柔性包装。

背景技术：

随着消费者对农产品需求的多样性和产品质量要求的提升，优质特色果蔬的市场潜力巨大。但是，我国保鲜技术较发达国家相对落后，商品化程度低，贮、运、销配套技术体系不完善，这与果蔬产品种类与品种繁多、季节性收获、集中上市形成了一定的“供需差”。目前，特色果蔬采前、采后技术手段耦合调控技术不到位，我国采后果蔬类产品腐烂损失高达15％-30％，每年的经济损失超过1800亿元。

葡萄品种多，近年来众多葡萄品种的葡萄保鲜技术不断涌现，但是控制果梗绿变一直是葡萄长期贮藏的节点技术。同时，诸多具有地方特色的薄皮葡萄贮运保鲜技术未曾突破，皮薄易破损、褐变、微生物腐败等已成为其产业效益的瓶颈。因此，开发薄皮葡萄专用保鲜技术对其产业发展意义重大。

低温贮藏是延长果蔬货架期最广泛使用的方法之一。在低温贮藏过程中，葡萄果梗的褐变是影响鲜食葡萄品质的主要因素，葡萄果梗的水分流失而干燥褐变，会导致浆果失水腐烂。由于葡萄果肉属于非呼吸跃变型，而葡萄果梗属于呼吸跃变型，因此，气调对葡萄果梗保绿具有积极的影响。

o2和co2是植物呼吸过程中的生物活性分子，降低o2，提高co2水平的结果之一是抑制呼吸作用，将氧气维持在一个较低的范围，具有减少基质氧化、抑制乙烯合成、叶绿素分解，较少vc损失的作用。高二氧化碳具有延迟呼吸跃变、较少养分消耗的作用，将果蔬放置于低氧高二氧化碳的环境中，从而达到延长植物的贮藏时间和保质期的目的。然而，长时间的低氧或高二氧化碳处理很可能对果蔬产生气体伤害，破坏其正常的生理生化代谢，反而降低葡萄贮藏期。

一种葡萄保鲜方法(cn110973236a)介绍了以下步骤：选择果梗鲜绿的带梗葡萄，留置长度约5～10cm的果梗采摘；采摘后在0～2℃下预冷6～12h；配置保鲜剂；对果梗进行斜向剪切处理，将果梗浸置于保鲜剂内；葡萄果实进行气调包装。其有益效果：结合气调包装保鲜技术，解决了无核白葡萄采后运输过程中的果实发生机械损伤和落粒问题，有效延缓无核白葡萄失水皱缩和果梗褐变。但是该方法对果梗步骤较为繁琐，并且保鲜剂的残留也是一个问题，本专利保鲜方法操作简单，在采摘前喷雾“山苍子精油+微生物拮抗”保鲜剂，抑控基底微生物，使采摘前促进葡萄吸收营养，并在采摘时抑制果梗失水褐变，能够较好的维持葡萄的硬度和抑制微生物对葡萄的侵染。

一种鲜食葡萄保鲜的方法(cn111066879a)公开采用二氧化氯缓释保鲜剂应用于鲜食葡萄采后流通贮藏保鲜。主要以亚氯酸钠为原生剂，由活化剂、粘合剂、稳定剂和吸水剂以适当比例混合而成，通过对二氧化氯的缓释配方进行优化，针对不同品种及特性的葡萄，配制出适合鲜食葡萄保鲜的二氧化氯缓释剂，既能释放又适当控制二氧化氯释放速度，具有释放量高、释放速率平稳、药效持久、化学稳定性好等优点。但是，二氧化氯的长时间的释放对葡萄机体造成伤害，本方法采摘后3-5h内进行处理后也仅用低氧高二氧化碳短时预处理30-40min，在贮藏前作为逆境胁迫，使葡萄机体内产生较强的抗逆性，最后用氮气脱二氧化碳，紧接着进行预冷，再放入冷藏贮藏即可，出库前一直保持map自发气调静态贮藏。操作步骤简单安全，适用性强。

一种葡萄保鲜方法(cn104522154a)在保鲜袋中放置吸水纸及保鲜剂，在保鲜袋内维持一定的湿度以及保鲜剂浓度，使葡萄的水分不易流失，保持新鲜。但是，该方法在长时间的运输中保鲜纸作用无法达到长期以及缓释抑菌目的等问题，本方法在采摘下就进行预处理，然后进行map自发气调静态贮藏，短时形成逆境，从而提高葡萄抗性，然后不再处理，不用保鲜剂的使用，葡萄食用安全性提高，维持葡萄自发的生理活性，维持葡萄保持新鲜。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种利用高浓度气体短时刺激启动鲜果应激反应，结合袋中袋活性包装材料，并通过梯度升温和袋中袋活性包装实现了薄皮葡萄动态贮运压裂技术难题的适于薄皮葡萄贮运的应激保鲜方法。

本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：

一种适于薄皮葡萄贮运的应激保鲜方法，具体方法步骤包括：

⑴采摘前用“山苍子精油+微生物拮抗菌剂”复合保鲜抑菌剂对葡萄果穗进行喷雾处理；

⑵挑选分拣3h后，使用浓度60％-80％的co2于保鲜大帐内处理20-30min，控制o2浓度处于3-5％，接着冲入n2脱除co2，脱除过程中气体充入速度40-50l/min，处理时间12-15min；

⑶0±2℃通风预冷24-36小时，微孔保鲜膜map自发气调静态贮藏；

⑷贮藏出库采用梯度升温处理，即开帐后库内温度升至3～7℃贮藏1.5-2小时，然后8～10℃贮藏1.5-2小时，然后设置为16-18℃贮藏2.5-3小时→出库；

⑸出库后葡萄采用袋中袋活性包装袋进行动态贮运。

而且，所述的“山苍子精油+微生物拮抗菌剂”复合保鲜抑菌剂使用方法为：

①将山苍子运用超临界co2萃取法提取，密封保存；

②使用时与葡萄专用微生物拮抗菌剂按照1:10-1:20混合使用。

一种适于薄皮葡萄贮运的应激保鲜柔性包装，主体结构为pe+pa复合材料吹塑而成，形成外层膜和内层膜结构，在内层膜的内侧设置“保鲜窗”，该“保鲜窗”包括温感记忆棉，在该温感记忆棉与内层膜之间由外向内依次设置有精油缓释胶囊层、透气层及1-mcp缓释层。

而且，所述的精油缓释胶囊层主体支撑层为无纺布，其中运用包埋技术以β-环糊精为基体，包埋山苍子精油，制作缓释胶囊，填充在无纺布支撑层中。

而且，所述的透气层为涂膜有干燥剂和脱氧剂的透气纸。

而且，所述的1-mcp缓释层主体支撑层为无纺布，内部设置有若干内置1-mcp颗粒剂的单元缓释包。

而且，所述的精油缓释胶囊层和1-mcp缓释层交叉放置。

而且，在外层膜和内层膜形成的空腔中设置有充气袋，在充气袋内层设置有吸氧膜。

而且，所述的吸氧膜分为两层，采用微型打孔技术将铁粉置于其中且不让铁粉外漏。

本发明的优点和积极效果是：

1、本发明方法首先在采摘前1-2天在葡萄果穗上喷雾“山苍子精油+微生物拮抗”保鲜剂，起到抑控基底微生物的作用，其中微生物拮抗菌剂为葡萄专用微生物菌剂(有效活菌数≥8亿个/ml)，使用时用100倍水稀释；采摘挑选分拣后3小时内使用60％-80％高浓度的co2于保鲜大帐内短时应激处理20-30min，并相对应的控制o2处于3-5％的较低范围内，接着通入n2脱除co2，通入速度40-50l/min，处理时间12-15min；紧接着对葡萄进行大帐差压通风预冷24-36小时，然后-1-0℃大帐内map自发气调静态贮藏，其中大帐为0.3mmpe；贮藏出库采用梯度升温方法，即开帐后库内温度升至3-7℃1.5-2小时→8-10℃1.5-2小时→16-18℃2.5-3小时→出库，出库后葡萄采用袋中袋活性包装进行动态贮运。

2、本发明方法中的袋中袋活性包装为pe+pa复合材料制作，外层膜和内层膜形成袋中袋结构，在外层膜和内层膜之间充气，然后挤压内层膜内侧形成的袋中袋葡萄存放空间，使其内部形成小型封闭真空空间，使葡萄运输过程中继续自发气调，在1-mcp与山苍子精油缓释扁状胶囊协同下，保持葡萄新鲜，同时温感记忆棉，起到降温和减震的作用。

3、本发明设计科学合理、结构简单，利用高浓度气体短时刺激启动鲜果应激反应，结合袋中袋活性包装材料，并通过梯度升温和袋中袋活性包装实现了薄皮葡萄动态贮运压裂等难题，实现小于0.219mm厚度薄皮葡萄动态运输压裂率低于3％，采用本技术薄皮葡萄保鲜30-40天好果度95％以上，无霉变，果梗保绿效果佳，有效解决了大量薄皮葡萄贮运难题，将有效推动了系列名特优薄皮葡萄产业的发展。

附图说明

图1为本发明中袋中袋活性包装袋内层结构截面图；

图2为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中硬度的影响；

图3为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中果穗呼吸强度的影响；

图4为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中mda的影响；

图5为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中电导率的影响；

图6为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中lox的影响；

图7为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中可溶性固形物的影响；

图8为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中叶绿素的影响；

图9为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中总酚的影响；

图10为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中pal的影响；

图11为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中sod酶活性的影响；

图12为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中cat酶活性的影响；

图13为本发明实施例实验中对薄皮葡萄贮藏中pod酶活性的影响。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

一种适于薄皮葡萄贮运的应激保鲜方法，具体方法步骤如下：

⑴采摘前2天用“山苍子精油+微生物拮抗菌剂”复合保鲜抑菌剂对葡萄果穗进行喷雾处理，所述的“山苍子精油+微生物拮抗菌剂”复合保鲜抑菌剂是将市售山苍子运用超临界co2萃取法提取，然后密封保存，使用时与葡萄专用微生物拮抗菌剂按照1:20混合使用，该葡萄专用微生物拮抗菌剂为市售。

⑵采后对葡萄进行筛选处理，在无磕碰、腐烂劣变等问题的好果中，挑选大小均一葡萄串备用；

⑶挑选分拣3h后，使用80％高浓度的co2于保鲜大帐内短时应激处理30min，并相对应的控制o2处于4％，接着用冲入n2脱除co2,脱除过程中气体充入速度为40l/min，处理时间为15min；

⑷对大帐内葡萄进行差压通风预冷24小时，然后调整冷库内温度为0℃，大帐内map自发气调静态贮藏，其中大帐为0.3mmpe；

⑸贮藏出库采用梯度升温处理，即开帐后库内温度升至5℃贮藏2小时,然后9℃贮藏2小时，然后设置为17℃贮藏3小时→出库；

⑸出库后葡萄采用袋中袋活性包装袋进行动态贮运。

如图1所示，所述的袋中袋活性包装袋为柔性包装，为pe+pa复合材料吹塑而成，形成外层膜1和内层膜2结构，在内层膜的内侧设置“保鲜窗”，保鲜窗约占内层膜面积的8％～12％，该“保鲜窗”为在内层膜的内侧设置有温感记忆棉8，在该温感记忆棉与内层膜之间由外向内依次设置有精油缓释胶囊层4、透气层5、1-mcp缓释层。

精油缓释胶囊层主体支撑层为无纺布，其中运用包埋技术以β-环糊精为基体，包埋山苍子精油，制作缓释胶囊，并填充在无纺布支撑层中。

透气层为涂膜有干燥剂和脱氧剂的透气纸，用于吸收葡萄与袋内层膜上表层的水分，吸收时水分将从1-mcp缓释层穿过，1-mcp吸收水分后增强释放效果。

mcp缓释层主体支撑层为无纺布6，内部设置有若干内置1-mcp颗粒剂的单元缓释包7，常温下抑制果梗释放乙烯，进行果梗保绿。

精油缓释胶囊层和1-mcp缓释层交叉放置，有效节省空间。

在外层膜和内层膜形成的空腔中设置有充气袋3，在充气袋内层设置有吸氧膜3-1，吸氧膜分为两层，采用微型打孔技术将铁粉置于其中且不让铁粉外漏，目的是为了充气时过滤氧气，减少袋中袋之间气体的氧气，以免袋内层漏气时氧气的突然增加，从而增强葡萄呼吸强度，促进葡萄衰老。

本发明提供了一种薄皮葡萄的保鲜方法，该方法能够较好的保持果实硬度，降低果梗呼吸强度，实现果梗保绿，提高贮藏保鲜效果。

采摘前1-2天对葡萄果穗喷上适当浓度的“山苍子精油+微生物拮抗菌剂”复合保鲜抑菌剂，起到抑控基底微生物的作用，其中微生物拮抗菌剂在采摘前加强水果对土壤环境中营养成分的吸收，对抗采摘形成的逆境，有效防止果穗失水褐变、果肉破损腐烂，达到抑菌、提高抗逆性的作用。

采后先进行大帐差压通风预冷15-24小时，然后-1-0℃于大帐内进行map自发气调静态贮藏，经过预冷后的葡萄快速降低到一定温度，可很快适应贮藏温度，不会因为热差出现水汽，对葡萄造成伤害。本方法采用压差通风预冷，使冷空气垂直通过预冷周转箱内的葡萄，使葡萄预冷均匀，避免送风短路、预冷效率低下等问题。大账内放置一定数量的干燥剂，吸收由于温差可能造成的水汽，同时将湿度保持在一定范围内。

葡萄果穗属于呼吸跃变型，本发明方法采用低o2高co2能抑制葡萄的呼吸作用，气调处理能够对呼吸跃变型果实有着积极作用。高co2气调预处理(co2浓度75％-85％,30-40min/次/周)，使机体内部对高浓度o2短刺激产生应激反应，调控代谢通路产生抗性，逆境胁迫因子作用隐退，最终达到延长葡萄贮藏期的目的；n2的作用为脱除co2，消除co2所形成的逆境环境，达到后期稳定的效果，也可使可溶性固形物等营养物质维持积极稳定的状态。

贮藏出库采用梯度升温程序，开帐后库内温度升至4-5℃2-3小时→9-10℃2-3小时→15-17℃2-3小时→出库，避免由于快速的温差过大致使葡萄表面霜气液化产生水珠，达到防止果实劣变、避免果实结露等现象发生的目的。

由于葡萄皮薄易挤压破损，本发明方法在贮运过程中采用袋中袋活性包装进行动态贮运，包装为pe+pa复合材料制作，通过充气使得袋中袋内形成小型封闭真空空间，使葡萄运输过程中继续自发气调，抑制果蔬呼吸作用，保持葡萄新鲜；同时内外层分别加固葡萄，内层真空固定葡萄，外层避免葡萄与箱体接触，减少由于震荡导致的葡萄破损。

袋中袋靠近葡萄的内层设置一层温感记忆棉，当放入葡萄时，温感记忆棉接触到葡萄，产生温差，使温感记忆棉其内部开放性细胞组织扩张，空气的流动性增强，使缓释剂释放效果增强。

利用本方法处理葡萄实验如下，实验结果见图2-如、13：

1.样品预处理

进行准备工作，进行库房消毒、控制冷库温度和湿度。供试品种为宁夏大青葡萄，由青铜峡市先锋大青葡萄种植专业合作社提供。大青葡萄果实采收之后进行筛选处理，在无磕碰、腐烂等劣变等问题的好果中，挑选大小均一葡萄串进行处理。

2.处理方法

在大帐中进行低氧高二氧化碳气体处理(二氧化碳浓度为80％，氧气浓度为4％，预处理30min)，处理完成后大帐内map自发气调静态贮藏。

3.测定指标

3.1理化指标

硬度、vc含量、叶绿素含量、可溶性固形物、果穗呼吸强度、细胞膜通透性、丙二醛(mda)含量、总酚含量

3.2关键酶活

过氧化物酶(pod)、苯丙氨酸解氨酶(pal)、超氧化物歧化酶(sod)、过氧化氢酶(cat)、脂氧合酶(lox)

4.实验结果

4.1薄皮葡萄贮藏中硬度的影响

葡萄采收后，果实细胞的细胞壁上含有的多糖被水解酶分解，细胞壁因此变得松散，细胞内聚力损耗，果实趋于软化。目前消费者多偏向于硬肉葡萄，致使硬度成为消费者的主要选择之一，实验结果得到该处理能够较好的保持果实硬度，使果实变得更加紧致，从图2中分析可知，80％二氧化碳对果实硬度具有一定的积极的调控效果，贮藏期间硬度一直高于对照组。

4.2对薄皮葡萄贮藏中果穗呼吸强度的影响

果穗为呼吸跃变型，葡萄果穗褐变是影响鲜食葡萄品质的主要因素之一，葡萄果穗容易失水变得干燥、褐变，使贮藏寿命受到严重失水的限制，加上葡萄在低温下更为敏感，导致葡萄果肉更易软化破损。如图3，本实验证明，80％co2预处理在低温贮藏的条件下，较好的抑制了果穗的呼吸强度，延迟了果穗峰值的到来，对葡萄果穗起到了保绿作用。

4.3对薄皮葡萄贮藏中mda、电导率和lox的影响

mda含量作为细胞膜和细胞膜过氧化产物的重要指标，是脂质过氧化的一个常见指标；膜通透性用相对电导率来表示，膜通透性越大，膜的损伤程度越大，营养物质流失速度加快。如图4-6，实验数据表明，80％co2处理的mda在贮藏期间整体低于对照组，同样在贮藏期间，电导率和lox酶活性相对于对照组也略有降低，总体来看，该处理较好的保护了细胞膜的完整性，抑制了细胞膜的膜脂氧化程度。

4.4对薄皮葡萄贮藏中可溶性固形物和叶绿素的影响

可溶性固形物能够反映果实品质状况，可以衡量水果成熟、衰老情况。图7-8中数据显示，贮藏前80％co2预处理对可溶性固形物和叶绿素产生短暂刺激，促进可溶性固形物和叶绿素增加后就维持在稳定的范围内。该处理很好地维持了果实的原有的颜色。

4.5对薄皮葡萄贮藏中总酚、pal的影响

众所周知，酚类化合物具有不同的抗氧化能力。从图9-10中可以看出，在co2的作用下，酚类物质总体上低于对照组。80％co2浓度的预处理抑制酚类化合物的合成和氧化，在一定程度上防止褐变。由于短时间刺激使葡萄贮藏前机体内部，提高了机体的抗逆性，使葡萄适应外部环境，使酚类化合物不需要抵抗外部压力。

pal催化苯丙烷代谢的第一步反应，在随后的反应中生成各种具有结构和防御功能的酚类化合物。pal在植物中主要有参与植物抗病、抗虫害、抗逆境的作用。在黑暗中，零摄氏度下葡萄本身能诱导pal基因的表达，数据表明，高水平的二氧化碳可以提高葡萄的宽容对温度变化，在低温和co2的共同作用下，出葡萄处于非逆境的氛围，使葡萄不需要合成酚类物质去抵御胁迫，使合成和酚类物质的氧化减少，从而有效地抑制了褐变现象。

4.6对薄皮葡萄贮藏中sod、cat、pod酶活性的影响

sod是含金属辅基的酶，能够消除超氧自由基(o2-)，与cat、pod等酶协同作用来预防活性氧和其他过氧化物自由基对细胞膜系统的伤害，从而减少自由基对有机体的毒害。超氧阴离子自由基(o2-)是生物细胞某些生理生化反应常见的中间产物。sod能够通过歧化反应清除生物细胞中的超氧阴离子自由基，生成h2o2和o2，h2o2再由cat进一步催化生成h2o和o2。对照组不同浓度co2长期气调处理的大青葡萄在0℃贮藏五周期间sod的变化整体呈现上升的趋势，图11-13数据可得，co2预处理整体在贮藏期间一次上升趋势，二氧化碳持续处理刺激了质膜的扩张，使氧气的持续进入刺激了超氧阴离子自由基的增多，从而促进了sod酶活性的增加，但分解超氧阴离子自由基的同时，增加了过氧化氢的含量，同时也促进了pod和cat的协同作用，使过氧化氢的含量下降，减少对细胞的伤害

尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的内容。